SpectraMax M5 酶標(biāo)儀詳解

SpectraMax M5 多功能酶標(biāo)儀是由 Molecular Devices 推出的一款全波長(zhǎng)掃描型、多檢測(cè)模式微孔板檢測(cè)設(shè)備。該儀器采用光柵單色器系統(tǒng)，支持紫外-可見(jiàn)波長(zhǎng)范圍內(nèi)的多模式檢測(cè)，包括吸光度、熒光強(qiáng)度、熒光偏振、時(shí)間分辨熒光和化學(xué)發(fā)光。SpectraMax M5 適用于多種科研應(yīng)用場(chǎng)景，如分子檢測(cè)、細(xì)胞分析、酶活性研究、藥物篩選和免疫實(shí)驗(yàn)等。

其設(shè)計(jì)理念強(qiáng)調(diào)檢測(cè)模式整合與數(shù)據(jù)精度控制，結(jié)合軟件支持與路徑校正功能，能夠?yàn)閷?shí)驗(yàn)室提供較為系統(tǒng)化的檢測(cè)解決方案，尤其適用于需要多波長(zhǎng)調(diào)節(jié)和中高通量檢測(cè)的實(shí)驗(yàn)環(huán)境。

一、美谷分子SpectraMax M5 酶標(biāo)儀核心檢測(cè)能力

SpectraMax M5 支持五種主要檢測(cè)模式：

1. 吸光度（Absorbance）

儀器配備雙光束光學(xué)系統(tǒng)，可進(jìn)行端點(diǎn)、動(dòng)力學(xué)和光譜掃描實(shí)驗(yàn)，波長(zhǎng)范圍覆蓋 200–1000 nm，波長(zhǎng)間隔最小可達(dá)1 nm。適用于常規(guī)蛋白定量、DNA濃度分析、細(xì)胞增殖檢測(cè)及酶動(dòng)力學(xué)反應(yīng)測(cè)定。

2. 熒光強(qiáng)度（Fluorescence Intensity, FI）

使用 PMT 檢測(cè)器進(jìn)行激發(fā)與發(fā)射波長(zhǎng)掃描，具備較高的信噪比與靈敏度。適合DNA染料分析、報(bào)告基因檢測(cè)、探針?lè)▽?shí)驗(yàn)等。

3. 熒光偏振（Fluorescence Polarization, FP）

通過(guò)熒光偏振技術(shù)測(cè)定分子結(jié)合引起的分子旋轉(zhuǎn)變化，適用于配體-受體結(jié)合、蛋白互作、小分子篩選等研究。

4. 時(shí)間分辨熒光（Time-Resolved Fluorescence, TRF）

采用延遲信號(hào)檢測(cè)技術(shù)，有效排除背景噪音，提高熒光檢測(cè)靈敏度。多用于敏感性要求較高的免疫分析，如DELFIA、LanthaScreen技術(shù)。

5. 化學(xué)發(fā)光（Luminescence）

該檢測(cè)模式無(wú)需外部激發(fā)光源，直接測(cè)定樣品發(fā)射光信號(hào)，適合ATP分析、報(bào)告基因?qū)嶒?yàn)、免疫發(fā)光等應(yīng)用。

二、光學(xué)與檢測(cè)系統(tǒng)

SpectraMax M5 的核心光學(xué)系統(tǒng)由雙光柵單色器構(gòu)成，不依賴(lài)濾光片即可實(shí)現(xiàn)波長(zhǎng)靈活調(diào)節(jié)。光源為氙燈，可覆蓋紫外至可見(jiàn)光范圍。

主要光學(xué)參數(shù)：

• 激發(fā)波長(zhǎng)范圍：250–850 nm（熒光模式）

• 發(fā)射波長(zhǎng)范圍：360–850 nm

• 吸光度波長(zhǎng)范圍：200–1000 nm

• 帶寬：標(biāo)準(zhǔn)5 nm

• 波長(zhǎng)選擇：步進(jìn)1 nm，無(wú)需濾光片更換

• 動(dòng)態(tài)范圍：>6個(gè)數(shù)量級(jí)（熒光/發(fā)光）

檢測(cè)器使用光電倍增管（PMT），能提供較低的背景噪音與較高的信號(hào)捕獲效率，適合弱信號(hào)檢測(cè)場(chǎng)景。

三、結(jié)構(gòu)與兼容性

SpectraMax M5 支持各種標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格的微孔板（6、12、24、48、96和384孔），具備前進(jìn)樣設(shè)計(jì)，便于在自動(dòng)化平臺(tái)中集成。

兼容功能包括：

• 自動(dòng)路徑校正（PathCheck 技術(shù)）

• 自定義震蕩與溫控設(shè)置（可選配）

• 光譜掃描與動(dòng)力學(xué)曲線(xiàn)采集

• 樣品高度識(shí)別與體積補(bǔ)償

PathCheck 技術(shù)通過(guò)實(shí)時(shí)測(cè)量每孔樣品高度，將結(jié)果轉(zhuǎn)換為等效1 cm光徑，優(yōu)化定量準(zhǔn)確性，尤其適用于微體積反應(yīng)體系。

四、軟件與數(shù)據(jù)處理

SpectraMax M5 配套的 SoftMax Pro 軟件 是其數(shù)據(jù)分析平臺(tái)，具備完整的數(shù)據(jù)處理與圖形輸出功能。

軟件主要功能：

• 多波長(zhǎng)掃描與光譜圖繪制

• 實(shí)時(shí)數(shù)據(jù)采集與監(jiān)控

• 多參數(shù)曲線(xiàn)擬合（線(xiàn)性、非線(xiàn)性、四參數(shù)、Logit等）

• 自動(dòng)背景扣除與標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)建模

• 實(shí)驗(yàn)?zāi)０遄远x

• 合規(guī)支持（用戶(hù)權(quán)限、數(shù)據(jù)審計(jì)、21 CFR Part 11）

SoftMax Pro 支持輸出PDF、Excel、CSV等格式文件，便于報(bào)告整合和共享。同時(shí)，可通過(guò)網(wǎng)絡(luò)接口與LIMS系統(tǒng)實(shí)現(xiàn)聯(lián)動(dòng)。

五、典型應(yīng)用領(lǐng)域

SpectraMax M5 的多模式支持使其在多學(xué)科研究中均有應(yīng)用價(jià)值，具體應(yīng)用領(lǐng)域如下：

1. 分子生物學(xué)

• DNA/RNA濃度測(cè)定

• 熒光染料分析（如PicoGreen、SYBR Green）

• 端點(diǎn)與動(dòng)力學(xué)熒光反應(yīng)分析

2. 生物化學(xué)與酶學(xué)研究

• 酶活性分析（吸光度與動(dòng)力學(xué)模式）

• 抑制劑篩選

• Michaelis-Menten與Lineweaver-Burk動(dòng)力學(xué)曲線(xiàn)構(gòu)建

3. 免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)

• 吸光度法ELISA

• 化學(xué)發(fā)光ELISA

• TRF法免疫檢測(cè)（用于高靈敏度檢測(cè)）

4. 藥物篩選與信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)

• 熒光偏振法篩選小分子抑制劑

• FRET/BRET 蛋白相互作用分析

• 藥效動(dòng)力學(xué)建模與反應(yīng)時(shí)間窗口測(cè)定

5. 細(xì)胞分析

• 報(bào)告基因表達(dá)（Luciferase, GFP等）

• ATP活性檢測(cè)（化學(xué)發(fā)光）

• 細(xì)胞凋亡與毒性分析

六、操作維護(hù)與使用建議

為保障設(shè)備性能與使用壽命，建議注意以下操作和維護(hù)事項(xiàng)：

• 光源壽命有限，建議根據(jù)使用頻率定期更換氙燈；

• 每次檢測(cè)前進(jìn)行儀器預(yù)熱及光學(xué)校正；

• 對(duì)于TRF與熒光實(shí)驗(yàn)，使用前需避免樣品殘留熒光背景干擾；

• 定期使用標(biāo)準(zhǔn)板進(jìn)行性能驗(yàn)證；

• 儀器閑置時(shí)建議斷電并使用防塵罩保護(hù)；

• 軟件操作日志應(yīng)定期導(dǎo)出與備份。

七、技術(shù)參數(shù)一覽

八、美谷分子SpectraMax M5 酶標(biāo)儀總結(jié)

SpectraMax M5 酶標(biāo)儀通過(guò)集成吸光度、熒光、發(fā)光、熒光偏振和時(shí)間分辨檢測(cè)功能，為實(shí)驗(yàn)室提供了一套靈活的分析平臺(tái)。其在光學(xué)設(shè)計(jì)、數(shù)據(jù)一致性控制、檢測(cè)模式轉(zhuǎn)換與軟件支持方面形成了一體化解決方案。適用于分子檢測(cè)、蛋白定量、細(xì)胞分析和藥物研發(fā)等多個(gè)研究方向，滿(mǎn)足多種檢測(cè)需求和方法學(xué)開(kāi)發(fā)場(chǎng)景。

通過(guò)模塊化結(jié)構(gòu)與標(biāo)準(zhǔn)化光學(xué)參數(shù)配置，SpectraMax M5 可幫助研究人員在提升實(shí)驗(yàn)效率的同時(shí)保持檢測(cè)質(zhì)量一致性，是具備綜合功能支持的實(shí)驗(yàn)室工具之一。